Propolis alt fraksiyonlarının antibiyofilm ve antikanser etkilerinin aydınlatılması

Abstract

Bu çalışmada Cezayir?in Mila ve Skikda bölgesine ait iki propolisin alt fraksiyonlarının (petrol eter, kloroform, etil asetat ve metanol) antibiyofilm ve antikanser etkileri araştırılmıştır. Antibiyofilm aktivite kristal viyole yöntemine göre belirlenmiştir. Sonuçlara göre, Mila propolisi Skikda propolisinden daha güçlü antibiyofilm aktiviteye sahiptir. En yüksek antibiyofilm aktiviteye 200 ?g/ml metanol fraksiyonuyla (%92) ulaşılmıştır. Skikda propolisinin etil asetat fraksiyonunun denenen konsantrasyonlarda herhangi bir antibiyofilm aktivitesi görülmemiştir. Antibiyofilm aktivite sonuçları floresan mikroskop görüntüleri ile de doğrulanmıştır. Floresan mikroskop analizine göre propolis ile muamele edilmiş bakteriyel biyofilm yapısının bozulduğu ve kontrol biyofilm yapısında görülen su kanallarının da olmadığı görülmüştür. Ayrıca floresan boyama ile biyofilm içindeki ölü hücre sayısında artış olduğu da tespit edilmiştir. FTIR analizine göre, propolisin hücre yüzeyindeki makromoleküllerde bazı değişikliklere yol açtığı bulunmuştur. Propolisin sitotoksik aktivitesi MTT testi ile saptanmıştır. Mila kaynaklı propolisin EC50 değeri 97-117 ?g/ml iken Skikda propolisininki 67-108 ?g/ml arasındadır. Cezayir propolisi, MDA-MB-231 hücre hattında tümör supresyonu ile ilişkili proteinlerin mRNA düzeylerinde belirgin derecede artışa neden olmuş ve apoptozu indüklemiştir. Bu sonuç Western blot ile de doğrulanmıştır. Sonuç olarak Cezayir propolisinin antikanser ve antibiyofilm etkili bileşiklere sahip olduğu söylenebilir.

In this study, the antibiofilm and anticancer effects of propolis subfractions (petroleum ether, chloroform, ethyl acetate and methanol) collected from the Mila and Skikda region of Algeria of were investigated. The antibiofilm activity was determined by the crystal violet assay test. The results of antibiofilm activity showed that Mila propolis had stronger antibiofilm activity than Skikda propolis. The highest antibiofilm activity was obtained at 200 ?g/ml methanol fraction (92%). It was not observed any antibiofilm activity in all assayed the concentrations of ethyl acetate fraction of Skikda propolis. Results were confirmed by fluorescent microscope images. According to the fluorescent microscope images, it was observed that the bacterial biofilm structure treated with propolis was disrupted and there were no water channels in the control biofilm structure. Moreover, an increase in number of dead cells in the biofilm was detected with fluorescent staining. According to FTIR analysis, it was found that propolis caused some changes in the macromolecules on cell surface. The cytotoxic activity of propolis was determined by the MTT test. While the EC50 values of propolis subfractions from Mila were in between 97 and 117 ?g / ml, that of Skikda propolis was found in between 67 and 108 ?g / ml. Algerian propolis caused a significant increase in mRNA levels of tumor suppressor genes and induced apoptosis in cell line. These results were confirmed by Western blot. All of these results showed that Algerian propolis contain effective compounds that has anticancer and antibiofilm activities.