Ovaryum Dokusunun Eksplant Kültürü

Abstract

Amaç: Ovaryum dokusu eksplant kültürü oluşturarak dokulardan göç eden stromal hücreleri izole etmeyi, ço ğaltmayı ve karakterize etmeyi hedefledik. Gereç ve Yöntem: 2 adet 4 haftalık (prepubertal) dişi Wistar Albino tipi sıçanların ovaryum dokularından eksplant kültürler oluşturuldu. Daha sonra prolifere olan overyan stromal hücrelere 2. pasajda (P2) flow sitometri analizi yapılarak CD29, CD54, CD90 (mezenkimal kök hücre yüzey antijeni) ve CD45 (hematopoetik kök hücre yüzey antijeni) ifadelerine bakıldı. Bulgular: Kültür ortamındaki hücrelerin proliferasyon yetenekleri ve morfolojik özellikleri seri pasajlar yapılarak incelendi. Stromal hücreler 2. günde dokulardan göç ederek kültür kaplarına yapıştılar ve çoğalıp 7. günde konflue (%70-80) oldular. Kültür ortam ındaki overyan stromal hücrelerin morfolojileri, faz kontrast mikroskobu ile incelendi ğinde iğ şeklinde ve fibroblast be nzeri hücre toplulukları olarak görüldü. Stromal hücre çoğalan kültür kaplarında mikroskop alt ında yap ılan sayımda s ırasıyla 2x106 ve 1.5x106 hücrenin ürediği gözlemlendi. İzole edilen overyan stromal hücrelerin flow sitometri analizlerinde CD54, CD90 ve CD45 yüzey antijenlerini eksprese ettikleri, CD29 yüzey antijenlerini ise eksprese etmedikleri belirlendi. Sonuç: Yapılan analizde kültür ortamında izole edip, ürettiğimiz overyan stromal hücrelerin hem hematopoetik hem de mezenkimal kök hücre belirteçlerinden bazılarını eksprese ettiklerini belirledik.