F-18 FDG ile lökositlerin invitro işaretleme etkinliğinin araştırılması

Abstract

Çalışmamızda, PET görüntüleme için F-18 FDG ile işaretli lökosit hazırlanmasında, in-vitro işaretleme işleminde, lökosit inkübasyon ısısının, kullanılan F-18 FDG dozunun ve işlemde insülin kullanımının, lökosit bağlanma yüzdesine etkisinin araştırılmasını planladık. Çalışma invitro ortamda yapıldı. Açlık kan şekeri 80-120 mg/dl olan 25-55 yaş aralığında 24 gönüllüden alınan kanların lökositleri izole edildi. 37?C’de ve oda ısısında inkübe edilen, 2 mCi ve 10 mCi F-18 FDG ile işaretlenen gruplar oluşturuldu. Her grup kendi içinde, insülin ilaveli ve insülin ilavesiz olarak 2 farklı gruba ayrıldı. Her grup için elde edilen materyal santrifüj edilerek bağlı olan lökositlerin çökmesi sağlandı. Bağlı olan ve bağlı olmayan komponent aktiviteleri ayrı ayrı ölçülerek total aktivite elde edildi. Ölçülen bağlı komponent aktivitesi total aktiviteye bölünerek bağlanma yüzdesi hesaplandı. Elde edilen veriler, SPSS 25.0 (IBM SPSS Statistics 25 software Armonk, NY: IBM Corp.) paket programıyla analiz edildi. Değişkenlerin ortalama±standart deviasyon, ortanca (minimum-maksimum) değerleri elde edildi. Bağımlı grupların karşılaştırmalarında Wilcoxon eşleştirilmiş iki örnek testi kullanıldı. (p<0,05) değerler istatistiksel olarak anlamlı olarak değerlendirildi. Çalışmamızda, insülin ilavesiz grupta ortalama bağlanma etkinliğini %39,5±0,072 (%23-%52), insülin ilaveli grupta ortalama bağlanma etkinliğini %40,2±0,073 (%27-%58) olarak hesapladık. Tüm gruplarda insülin uygulamasının istatistiksel olarak anlamlı fark oluşturmadığı saptandı (p>0,05). İnsülin uygulanmayanlarda, yüksek doz F-18 FDG ile bağlanan grupta bağlanma yüzdesinin, düşük doz F-18 FDG ile bağlanan gruba göre istatistiksel olarak anlamlı düzeyde yüksek olduğu saptanırken (p=0,049), insülin uygulananlarda ise, düşük doz ve yüksek doz F-18 FDG ile bağlanmanın istatistik açıdan anlamlı fark oluşturmadığı görüldü (p=0,09). 37?C’de inkübasyon uygulanan insülin ilaveli (p=0,036) ve insülin ilavesiz (p=0,042) gruplarda, oda ısısında inkübe edilen gruplara göre bağlanma yüzdesinin istatistiksel olarak anlamlı düzeyde yüksek olduğu görüldü. F-18 FDG ile lökosit işaretleme, enfeksiyon tanısında kullanılması mümkün olan bir yöntem olup,37?C’de inkübasyon ve yüksek doz F-18 FDG ile işaretleme bağlanma yüzdesini arttırırken, insülin uygulanması bağlanma yüzdesini değiştirmemektedir.

In our study, we aimed to investigate the effect of leukocyte incubation temperature, F-18 FDG dose and the use of insulin in the process on leukocyte binding percentage in F-18 FDG labeled leukocyte PET study. The study was performed in invitro environment. Leukocytes were isolated from blood from 24 volunteers (25-55 years) with fasting blood glucose of 80-120 mg/dl. Groups were incubated at 37°C and room temperature and labeled with 2 mCi and 10 mCi F-18 FDG. Each group was divided into two groups as insulin added and not added. The material obtained for each group was centrifuged and leukocytes were precipitated. Total activity was obtained by measuring the bound and non-bound component activities separately. The bound component activity was divided into total activity and the binding percentage was obtaine. Data were analyzed by SPSS 25.0 (IBM SPSS Statistics 25 software -Armonk, NY: IBM Corp.). Continuous variables are expressed as mean ± standard deviation, median (minimum-maximum). Wilcoxon Paired Two Sample Tests were used in the dependent group comparisons. P<0.05 was considered statistically significant in all analyzes. In our study, we calculated the mean percentage of attachment in the insulin-free group as % 39,5±0,072 (%23-%52), the percentage of mean attachment in the insulin supplemented group as %40,2±0,073 (%27-%58). There was no statistically significant difference in insulin administration in all groups (p>0,05). In the insulin free group, the percentage of binding of high-dose F-18 FDG was found to be significantly higher than low-dose F-18 FDG (p=0.049), whereas in the insulin-treated group, low-dose and high-dose F-18 FDG addition was no significant difference (p = 0.09). Insulin supplementation (p=0.036) and insulin-free (p=0.042) incubated at 37°C were found to be significantly higher than the incubation groups at room temperature. Leukocyte marking with F-18 FDG is a method that can be used in the diagnosis of infection. High temperature incubation and high dose F-18 FDG marking increases the binding percentage, while insulin administration does not alter the binding percentage.