Üretra darlıklarında mikrorna’ların rolü

Abstract

Üretra darlığı, hasta sağlığını ve yaşam kalitesini olumsuz etkileyen, üretranın yeterli genişleyebilme özelliğini kaybetmesi olarak tanımlanabilir. Genellikle spongiyofibrozis ve sonrasında gelişen epitel hasarı ile oluştuğu kabul görse de, bu süreçlerin detayları kesin olarak bilinmemektedir. Bu çalışmamızda üretra darlığının patofizyolojisinin aydınlatılmasına katkıda bulunmayı amaçladık. Patofizyoloji ortaya konulabilirse, yeni tedavi yöntemleri de geliştirilebilir. Üretra darlığı tedavisi cerrahi yöntemlerle yapılmaktadır. Hasta özelliklerine göre noninvaziv ve daha invaziv yöntemler tercih edilebilir. Bazı durumlarda noninvaziv tedavi yöntemlerinde ısrar edilmesi faydadan çok zarar verebilmekte ve kesin tedavi olan üretroplasti başarısını olumsuz etkileyebilmektedir. Hasta bazlı düşünüldüğünde erken nüks öngörülebilirse ve etiyoloji aydınlatılabilirse noninvaviz yöntemlerle ısrar edilmeden, kesin tedavi olan üretroplastinin erken uygulanması gündeme gelebilir. Özellikle yakın dönemde çeşitli hastalıkların tanısında ve prognoz tayininde mikroRNA’lar (miRNA) ile ilgili literatürde çeşitli çalışmaların yapıldığı görülmektedir. Bu amaçlar doğrultusunda miRNA’ların üretra darlıklarındaki rollerini araştırmayı planladık. Pamukkale Üniversitesi Üroloji Anabilim Dalı’nda Mart 2022 ve Kasım 2022 tarihleri arasında, bukkal mukozal greft ile üretroplasti ve anastomotik üretroplasti yapılan toplam 45 hasta çalışmaya dahil edildi. Hasta grubu olarak, travmatik nedene bağlı gelişmeyen üretra darlığı bulunan, bukkal mukozal greft ile üretroplasti yapılan 30 hastanın, üretroplasti sırasında dar ve spogiyofibrozisli üretra dokusundan örnek alındı. Kontrol grubu olarak, travmatik nedene bağlı gelişen üretral stenozu bulunan, anastomotik üretroplasti yapılan 15 hastanın, üretroplasti sırasında spatülize edilecek olan sağlıklı üretra dokusundan örnek alındı. Her iki grupta alınan üretra dokuları cerrahi tedavi başarısını olumsuz etkilemeyecek düzeyde idi. Toplanan üretra dokularından literatür taraması sonucu belirlenen miR-146a-5p, miR-155-5p, miR- 142-3p, miR-26b, miR-129-5p, miR-9-5p, miR-29a moleküllerinin total RNA izolasyonu yapılarak katlı değişim değerleri gruplar arası değerlendirildi. Verilerin tanımlayıcı istatistiklerinde ortalama, standart sapma, medyan en düşük en yüksek, frekans ve oran değerleri kullanıldı. Değişkenlerin dağılımı Kolmogorov- Smirnov test ile ölçüldü. Nicel bağımsız verilerin analizinde Kruskal-Wallis, Mann-Whitney U test kullanıldı. Analizlerde SPSS 28.0 programı kullanıldı. Tüm analizlerde P<0.05 istatistiksel olarak anlamlı kabul edildi. Travmatik nedene bağlı gelişmeyen üretra darlığı bulunan 30 hastalık grup ve 15 hastalık kontrol grubu arasında miR-29a, miR-155-5p, miR-26b, miR-129-5p, miR- 142-3p, miR-146-5p katlı değişim değeri anlamlı farklılık göstermemiştir (P>0.05). Üretra darlığı olan grupta miR-9-5p katlı değişim değeri kontrol grubundan istatiksel anlamlı olarak (P < 0.05) daha düşük bulundu. Yaptığımız literatür taramasına göre, bu çalışma travmatik nedene bağlı olmayan üretra darlığı bulunan üretra dokusu ve kontrol grubu üretra dokusu arasında miRNA katlı değişim değerlerini karşılaştırılan ilk çalışmadır. Sonuç olarak, çalışmamızda miR-9-5p’nin üretra darlığının patofizyolojisine ışık tutabileceğini saptadık. miR-9- 5p’nin koruyucu etkileri olabileceğini ancak hastaların klinik bulgularının, üretral fibrozisteki patofizyolojik sürecin tamamlanmasından daha önce ortaya çıktığını gösterdik.

Urethral stricture can be defined as the loos of adequate expandability of the urethra, which adversely affects patient health and quality of life. Although it is generally accepted that it occurs with spongiofibrosis and fallowing epithelial damage, the details of these processes are not known precisely. In this study, we aimed to contribute to the explanation of the pathophysiology of urethral stricture. If the pathophysiology can be revealed, new treatment methods can be developed. The treatment of urethral stricture is performed by surgical methods. Non-ivasive and invasive methods can be preferred according to patient characteristics. In some situations, insisting on noninvasive treatment methods may do more harm than good and may negatively affect the success of urethroplasty, which is the definitive treatment. Considering on a patient basis, if early recurrence can be predicted and the etiology can be clarified, early administration of urethroplasty, which is a definitive treatment, may come to the fore without insisting on non-invasive methods. Especially recently, it is seen that various studies have been carried out in the literature on microRNAs (miRNA) in the diagnosis and prognosis of various diseases. For these purposes, we projected to research the role of miRNAs in urethral strictures. Pamukkale University Department of Urology in March 2022 between November 2022, a total of 45 patients who underwent urethroplasty with buccal mucosal graft and anastomotic urethroplasty were included in the study. As the patient group, specimens were taken from the narrow and spogiofibrosis urethral tissue of 30 patients who had urethral stricture that did not develop due to traumatic causes and who underwent urethroplasty with buccal mucosal grafts. As a control group, specimens were taken from healthy urethral tissue spatulized during urethroplasty from 15 patients who had urethral stenosis due to traumatic causes and underwent anastomotic urethroplasty. The urethral tissues taken in both groups were at a level that did not negatively affect the success of surgical treatment. The miRNAs to be investigated from the collected urethral tissues were determined by literature review. miRNAs to be researched were determined as miR-146a-5p, miR-155-5p, miR-142-3p, miR-26b, miR-129-5p, miR-9-5p, miR-29a. Total RNA was isolated from the urethra tissues collected from the individuals participating in the study by means of a commercial kit. The expression levels of the determined miRNA molecules in the obtained RNA samples were investigated by real-time PCR method. 2ΔCt method was used to evaluate miRNA expressions. The fold change values of the miRNAs found by the analyzes were compared statistically between the groups. Mean, standard deviation, median lowest, highest, frequency and ratio values were used in the descriptive statistics of the data. The distribution of variables was measured with the Kolmogorov- Smirnov test. Kruskal-Wallis, Mann-Whitney U test was used in the analysis of quantitative independent data. SPSS 28.0 program was used in the analysis. P<0.05 was considered statistically significant in all analyses. The fold change values of miRNAs were compared between the group of 30 patients with non-traumatic urethral stricture and the control group of 15 patients. In the results, fold change values of miR-29a, miR-155-5p, miR-26b, miR-129-5p, miR-142-3p, miR-146-5p did not differ significantly (P > 0.05). The fold change value of miR-9- 5p in the group with urethral stricture was found to be statistically significantly (P < 0.05) lower than the control group. According to our literature review, this is the first study to compare miRNA fold change values between urethral tissue with non-traumatic urethral stricture and control group urethral tissue. In conclusion, we found in our study that miR-9-5p may explain the pathophysiology of urethral stricture. We have demonstrated that miR-9-5p may have protective effects, but the clinical findings of patients appear before the completion of the pathophysiological process in urethral fibrosis.